16 Nov ¿Por qué debería preocuparse por las impurezas del agua?
Calidad del agua de laboratorio: PCR, HPLC e IHC
En ELGA Labwater sabemos que obtener resultados fiables y precisos depende en gran medida de la calidad de sus reactivos.
Es simple: entran reactivos deficientes, salen malos resultados.
Reducir costos con una enzima o reactivo de baja calidad no vale la pena: los análisis fallidos y los resultados irreproducibles cuestan tiempo y frustración. Lo mismo ocurre con el agua de laboratorio. Asegurarse de usar el nivel correcto de pureza es un paso sencillo para obtener resultados consistentes y precisos.
Los contaminantes o desequilibrios iónicos en el agua de laboratorio pueden afectar seriamente los datos:
- Las impurezas en el agua pueden afectar la mayoría de las reacciones enzimáticas necesarias para técnicas básicas de biología molecular.
- El almacenamiento de agua purificada favorece la producción de lixiviables y la proliferación de bacterias.
Estos son algunos ejemplos de cómo las impurezas del agua impactan técnicas experimentales concretas:
Técnicas de blotting
El éxito con las transferencias Southern, Northern o Western depende de la calidad del agua utilizada para preparar muestras y soluciones. La contaminación bacteriana puede introducir proteínas adicionales que comprometan la transferencia Western. Las nucleasas bacterianas pueden degradar ácidos nucleicos durante las transferencias Northern y Southern, y las moléculas orgánicas extrañas pueden interferir con la hibridación al unirse de forma inespecífica en lugar de al ADN o ARN. Una contaminación iónica elevada puede detener la migración durante la electroforesis.
Análisis de trazas: LC-MS, GC-MS y GFAAS
Estas técnicas analíticas de alta sensibilidad requieren agua de muy elevada pureza. La espectrometría de masas con plasma acoplado inductivamente (ICP-MS), por ejemplo, exige soluciones con prácticamente cero iones o elementos adicionales. Con niveles de detección en partes por trillón (ppt), las impurezas pueden generar concentraciones artificialmente altas o errores en los blancos y las muestras de calibración, afectando gravemente la precisión de los resultados.
Cromatografía
La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) detecta componentes en mezclas complejas, a veces en el rango de partes por billón (ppb). Los compuestos orgánicos pueden competir con el analito y reducir los niveles retenidos en la columna. Las bacterias y los contaminantes iónicos pueden afectar algunas separaciones cromatográficas.
En cromatografía iónica (IC), los niveles de trazas de iones tienen un impacto mayor que en HPLC y pueden conducir a resultados inexactos. Los gases disueltos como el dióxido de carbono pueden alterar el pH de la fase móvil, modificar los tiempos de elución o reducir la capacidad efectiva de la fase estacionaria. Las partículas y coloides pueden generar alta contrapresión, afectando las bombas y la integridad del análisis.
PCR
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es especialmente sensible a la calidad del agua. Las nucleasas disueltas pueden inhibir la reacción y eliminar el producto estable, por lo que el agua libre de nucleasas es indispensable. Los contaminantes inorgánicos también representan un riesgo: las ADN polimerasas son altamente sensibles a cationes comunes que pueden alterar la unión al sustrato e inhibir la actividad enzimática. Los compuestos inorgánicos cargados negativamente pueden competir con el ADN en el sitio activo de la polimerasa, interrumpiendo los experimentos.
Histología e inmunohistoquímica (IHC)
La calidad del agua es un área clave en la resolución de problemas cuando los experimentos de inmunohistoquímica no funcionan. Las bacterias pueden adherirse a las secciones de tejido y producir artefactos en las muestras montadas. Los contaminantes bacterianos también pueden liberar fosfatasa alcalina (AP), que interfiere con procedimientos IHC que usan AP para detección cromogénica. Los iones metálicos pueden causar precipitación no deseada en soluciones de tinción o interferir con la unión anticuerpo-antígeno.
Acerca de Veolia
El grupo Veolia es referencia mundial en la gestión optimizada de recursos. Presente en los cinco continentes con casi 179.000 empleados, diseña e implementa soluciones para la gestión del agua, los residuos y la energía, en favor del desarrollo sostenible de ciudades e industrias. En 2019, llevó agua potable a 98 millones de habitantes, saneamiento a 67 millones, produjo ~45 millones de MWh y valorizó 50 millones de toneladas de residuos. Facturación consolidada 2019: 27.189 millones de euros. www.veolia.com
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